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clonage d'ADN soustractive

Une différence de clonage méthode ; une technique pour la comparaison de deux parentes types cellulaires (par exemple les cellules une cellule avec une mutation de la suppression et la normale) et l'isolement de l'un (le testeur) de l'ADN qui est absent de l'autre (le pilote). Testeur de l'ADN est clivé avec une nucléase de restriction qui permet son intégration ultérieure dans un vecteur de clonage ; un excès du pilote ADN est cisaillé au hasard. Les deux préparations sont mélangées, fondu et recuits à la forme, entre autres espèces, duplex composé de brins de différentes sources (inter-ressource recto verso, IRD). Produit la fraction de la recuite, les deux brins dont ont été clivés à des sites de restriction, et qui est donc susceptible d'être cloné, s'enrichiront dans ces séquences pour lesquelles il n'y avait aucune concurrence au hasard ne cisaillé pilote ADN, c'est-à-dire ceux qui sont propres à l'appareil de contrôle ADN, surtout quand le recuit est résilié avant que l'équilibre est établi (cinétique d'enrichissement). L'ADN unique séquences formeront donc une forte proportion du recuit produit ADN cloné avec succès.

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